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      人類胚胎早期發(fā)育的黑匣子 正在緩緩打開?

      放大字體  縮小字體 發(fā)布日期:2020-01-09 11:17:44    瀏覽次數(shù):149
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      建立三維培養(yǎng)系統(tǒng)、繪制分子和形態(tài)發(fā)育全景圖 人類胚胎早期發(fā)育的黑匣子 正在緩緩打開? 人的生命起源于早期胚胎,但人類胚胎著床后發(fā)育是怎樣進(jìn)行的?胎兒形成即原腸前人胚胎和多能干細(xì)胞的發(fā)育過程有沒有圖跡可

      建立三維培養(yǎng)系統(tǒng)、繪制分子和形態(tài)發(fā)育全景圖
      人類胚胎早期發(fā)育的黑匣子 正在緩緩打開?

      人的生命起源于早期胚胎,但人類胚胎著床后發(fā)育是怎樣進(jìn)行的?胎兒形成即原腸前人胚胎和多能干細(xì)胞的發(fā)育過程有沒有圖跡可循?科學(xué)家們一直在為這些生命難題找尋答案。

      國際頂級(jí)期刊《自然》日前以長文形式在線發(fā)表了昆明理工大學(xué)靈長類轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)研究院的李天晴教授和季維智院士等與云南省第一人民醫(yī)院合作完成的一項(xiàng)研究成果,他們首次建立人胚胎三維培養(yǎng)系統(tǒng),首次系統(tǒng)揭示了原腸前人胚胎和多能干細(xì)胞的發(fā)育過程。他們所繪制的分子和形態(tài)發(fā)育全景圖,填補(bǔ)了相關(guān)領(lǐng)域的空白,為研究胚胎著床后早期發(fā)育建立了重要的研究基礎(chǔ)。

      從受精卵著床到第14天原腸胚形成前 人類胚胎發(fā)育仍是神秘“黑匣子”

      人類受精卵的發(fā)育,始于一系列卵裂和形態(tài)發(fā)生重排,形成囊胚。晚期囊胚包含三個(gè)不同的細(xì)胞譜系,即上胚層細(xì)胞及內(nèi)胚層細(xì)胞和滋養(yǎng)外胚層兩個(gè)胚外組織。在進(jìn)入子宮后,上胚層細(xì)胞產(chǎn)生三胚層細(xì)胞以及整個(gè)胎兒,而后兩者分別產(chǎn)生卵黃囊和胎盤。對囊胚前胚胎的發(fā)育,科學(xué)家們已經(jīng)開展廣泛的研究,取得了一定進(jìn)展。

      然而,在發(fā)育的第7天,人胚胎需植入母親的子宮中才能繼續(xù)存活和發(fā)育。這個(gè)階段胚胎在宮體發(fā)育時(shí)三維時(shí)空上受到復(fù)雜而精細(xì)的調(diào)控,受限于倫理和研究技術(shù)的限制,研究材料無法獲得,同時(shí)又缺乏相應(yīng)的體外研究體系,從受精卵著床到第14天的原腸胚形成前,胚胎的發(fā)育長期以來是一個(gè)神秘的“黑匣子”。

      “原腸開始形成以后,神經(jīng)系統(tǒng)開始形成,逐漸形成胎兒,就不是胚胎了。早期胚胎在子宮內(nèi)究竟發(fā)生了什么樣的變化?什么樣的分子機(jī)制可以調(diào)控和維持它的正常發(fā)育?哪些因素又可以影響它的正常發(fā)育?這些都是需要解決的問題。”李天晴告訴科技日報(bào)記者,其實(shí)人懷孕的前2至3周,是保證胎兒發(fā)育的核心關(guān)鍵期。

      其中囊胚的產(chǎn)生,約在第5至6天時(shí)間內(nèi),形成了生命的第一次譜系分化;第二個(gè)階段實(shí)際上就是開始著床的階段,這是決定胚胎能不能往下發(fā)育的核心關(guān)鍵過程,如果著床后胚胎發(fā)育營養(yǎng)跟上、發(fā)育正常,就可以順利長成一個(gè)胎兒;第三個(gè)階段就是原腸的形成,如果三胚層出現(xiàn)問題了,那么胎兒發(fā)育肯定會(huì)出現(xiàn)先天性發(fā)育缺陷,很多情況下會(huì)形成神經(jīng)管發(fā)育不全、腦癱、脊柱發(fā)育不全等疾病。第一個(gè)階段當(dāng)前研究比較多,對第三個(gè)階段,由于存在較大的倫理問題,目前還無法開展相關(guān)研究。

      因此,原腸前著床階段的研究,對人胚胎發(fā)育關(guān)鍵事件的理解,以及對人類干細(xì)胞、組織器官再生研究和應(yīng)用,同時(shí)對不孕癥、早期發(fā)育疾病的預(yù)防與治療極為關(guān)鍵。

      繪制分子和形態(tài)發(fā)育全景圖 對早期胚胎發(fā)育的認(rèn)知有望突破

      “實(shí)際上,我們的研究,就是把人原腸前胚胎關(guān)鍵發(fā)育的分子機(jī)制,以及它的形態(tài)學(xué)發(fā)育過程畫出一個(gè)完整的圖,反映這個(gè)過程產(chǎn)生了什么樣的變化。也就是說,我們的研究有望打開人類胚胎最初階段的‘黑匣子’,有望對生命的認(rèn)知獲得突破。”李天晴說。

      研究組首次將人囊胚在三維(3D)條件下培養(yǎng)到第14天的原條階段,但未出現(xiàn)早期神經(jīng)系統(tǒng)的發(fā)育,符合胚胎研究的國際倫理準(zhǔn)則。研究取得的突破,主要是揭示了上胚層細(xì)胞、下胚層細(xì)胞和滋養(yǎng)層細(xì)胞譜系分化和發(fā)育的動(dòng)態(tài)及分子調(diào)控網(wǎng)絡(luò);其次,研究發(fā)現(xiàn)羊膜上皮細(xì)胞是上胚層細(xì)胞分離出來的第一類細(xì)胞系,不同于嚙齒類動(dòng)物,人羊膜上皮細(xì)胞發(fā)生于原條形成之前,但其特性和分子機(jī)制還不清楚。研究組發(fā)現(xiàn),與上胚層細(xì)胞相比,羊膜上皮細(xì)胞顯著地下調(diào)多能性基因,其形成與基底膜的缺失顯著相關(guān),并有獨(dú)特的分子表達(dá)譜。他們還首次闡明細(xì)胞滋養(yǎng)層、絨毛外細(xì)胞滋養(yǎng)層和合胞體滋養(yǎng)細(xì)胞在胚胎著床后的分化以及引起分化的信號(hào)和轉(zhuǎn)錄因子,揭示了絨毛外細(xì)胞滋養(yǎng)層在早期胚胎中不同于中、后期胎盤的功能。

      此外,他們還揭示了上胚層細(xì)胞即多能干細(xì)胞著床后,就很快從“原始態(tài)”向“始發(fā)態(tài)”的轉(zhuǎn)變。其多能干細(xì)胞表達(dá)譜的變化,主要發(fā)生在內(nèi)細(xì)胞團(tuán)到著床前上胚層細(xì)胞以及原條產(chǎn)生的兩個(gè)階段。多能干細(xì)胞在著床到第14天期間,保持相對穩(wěn)定狀態(tài),其發(fā)育和轉(zhuǎn)化是由不同的多能因子協(xié)調(diào)作用所決定的。通過人和猴子胚胎的轉(zhuǎn)錄組分析,研究組發(fā)現(xiàn)猴子和人上胚層細(xì)胞在代謝上具有明顯差異,而在維持干細(xì)胞多能性以及發(fā)育的關(guān)鍵分子和信號(hào)通路上具有保守性。

      李天晴表示,通過此項(xiàng)研究,我們對人生命的認(rèn)識(shí)也更加深刻。未來,人們可以由此提高試管嬰兒的成功率,解決人類生殖發(fā)育的一系列問題;其次,可能找到一些早期的標(biāo)志物,比如如何篩選優(yōu)質(zhì)的胚胎實(shí)現(xiàn)優(yōu)生優(yōu)育;再次,這一研究還初步搞清了干細(xì)胞發(fā)育這一再生醫(yī)學(xué)領(lǐng)域一個(gè)非常重要的難題。

      三維人囊胚培養(yǎng)體系 為破解生命發(fā)育相關(guān)謎題提供全新平臺(tái)

      正如前文所述,此前學(xué)界無法獲得自然受孕后早期著床后階段的人類胚胎,因此多用嚙齒類胚胎或非人靈長類胚胎等模式生物替代研究,但這樣就無法準(zhǔn)確反映人類分子調(diào)控等規(guī)律的真實(shí)情況。同時(shí),新近人類妊娠前胚胎發(fā)育的成果,包括《科學(xué)》雜志不久前發(fā)表的論文,仍然受到二維技術(shù)平臺(tái)的限制,無法模擬體內(nèi)條件。

      李天晴介紹說,在獲得嚴(yán)格的倫理允許和病人知情同意的條件下,研究組利用臨床捐獻(xiàn)的胚胎,首先通過改善培養(yǎng)基和培養(yǎng)方法,開發(fā)了一個(gè)三維(3D)人囊胚培養(yǎng)體系,克服二維(2D)無法模擬胚胎發(fā)育的缺陷,首次將人囊胚在3D條件下培養(yǎng)到第14天的原條階段,以更接近體內(nèi)的真實(shí)條件。

      “建立3D胚胎的核心,在于細(xì)胞的生長需要有最接近人體生理環(huán)境的培養(yǎng)體系,這個(gè)體系可理解為供給細(xì)胞和胚胎的食物與胚胎生長的空間環(huán)境。此前,國內(nèi)外在培養(yǎng)體系的研究還有諸多缺陷,導(dǎo)致所培育的胚胎細(xì)胞無法保持空間的立體結(jié)構(gòu),如一灘水一樣,表面塌陷,因此細(xì)胞只能和培養(yǎng)皿進(jìn)行表面接觸,成為2D環(huán)境,這樣細(xì)胞之間也只能一對一或僅發(fā)生少量的連接,這對進(jìn)一步研究細(xì)胞之間的相互作用具有重大缺陷。”李天晴表示,實(shí)際上,細(xì)胞與細(xì)胞之間的接觸,原本是三維的環(huán)境,如同我們把一顆水珠懸起來,不讓它塌下去。由于2D條件缺乏空間支撐的結(jié)構(gòu),胚胎到了一定時(shí)間就無法進(jìn)一步發(fā)育,因此通常2D胚胎只能到第12天左右。

      目前,他們自主研發(fā)的培養(yǎng)體系可實(shí)現(xiàn)3D胚胎的培育,并能高度地模擬體內(nèi)胚胎的環(huán)境,胚胎經(jīng)歷不同形態(tài)的發(fā)育并自發(fā)組裝成2D條件下無法產(chǎn)生的3D結(jié)構(gòu),包括胚胎雙層杯盤、羊膜、基底膜、初級(jí)和靈長類獨(dú)特的次級(jí)卵黃囊、前后軸和原條。李天晴深信,他們自主研發(fā)的培養(yǎng)體系,將給學(xué)界提供一個(gè)新平臺(tái),用以研究生命前沿的相關(guān)課題。

      本報(bào)記者 趙漢斌

       
      (文/小編)
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